摘要： GlcNAz作为探针,可用于代谢标记细胞内O-GlcNAc修饰蛋白,帮助蛋白富集和后续质谱鉴定.但细胞内大量存在的天然糖供体 (UDP-GlcNAc) 会竞争结合OGT蛋白,从而降低 GlcNAz利用效率.为了提高GlcNAz利用率,在分子对接基础上,对OGT进行结构改造,构建了两种sOGT突变体(M130A、Y470A)并测定了它们对UDP-GlcNAz的利用率.与野生型sOGT相比,两种突变体对UDP-GlcNAz的利用率 (相对于UDP-GlcNAc)均有显著提高,细胞内 M130A 对 GlcNAz 的利用率(相对于 GlcNAc)提高了 2.2 倍 . 最终结果表明:M130A能显著提高细胞对探针GlcNAz的利用率,为大量鉴定细胞内O-GlcNAc修饰蛋白提供了新思路.