摘要:
通过基因工程法优化人胶原蛋白的密码子序列,以人Ⅲ型胶原蛋白α1链为模板,(Gly-X-Y)为最小研究单位,构建重组质粒pET30a(+)-3CH,利用Escherichia coli 发酵和蛋白纯化技术制备重组人Ⅲ型胶原蛋白(Recombinant human type III collagen,RHCIII)。研究结果证实,RHC III的表达量为3.5g/L,利用亲和/离子交换层析工艺纯化后的RHC III纯度为95.44%,RHC Ⅲ蛋白溶液在4℃下可以保存12个月,稳定性良好,无细胞毒性,为重组人胶原蛋白产业化奠定了良好基础。