南开大学学报(自然科学版) ›› 2018 ›› Issue (6): 48-53.

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小立碗藓ACL1的晶体制备

  

  1. 南开大学生命科学学院
  • 出版日期:2018-12-20 发布日期:2019-01-15
  • 基金资助:
    国家自然科学基金(31570293);

  • Online:2018-12-20 Published:2019-01-15

摘要: 乙烯是一种重要的植物激素,1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶(ACS)是高等植物乙烯合成途径中的限速酶和主要调节位点.然而低等陆生植物小立碗藓基因组编码的ACS同源蛋白PpACL1却被发现不具有ACS活性,而是具有β-C-S裂解酶活性.为了探究PpACL1与高等植物ACS酶活性差异的成因,采用结构生物学方法来进行研究.对小立碗藓PpACL1蛋白进行了表达、纯化和结晶,得到了大且棱角分明的块状PpACL1晶体,然而该晶体的X射线衍射分辨率却仅有0.7 nm左右.为得到可用于结构解析的PpACL1晶体,进行了添加剂的筛选以及PpACL1晶体的防冻处理等优化工作,使晶体衍射质量得到了显著提高,最终收集得到了最高分辨率达0.32 nm的PpACL1晶体衍射数据,初步具备了结构解析的条件. 

关键词: 乙烯合成, 小立碗藓, PpACL1, 蛋白纯化, 晶体制备

中图分类号: 

  • O78