南开大学学报(自然科学版) ›› 2019 ›› Issue (3): 11-.

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利用酵母双杂交技术筛选与CCDC58相互作用的蛋白

  

  • 出版日期:2019-06-20 发布日期:2019-07-04

  • Online:2019-06-20 Published:2019-07-04

摘要: 卷曲螺旋是存在于多种天然蛋白质中的一种结构域,涉及调节基因表达,膜融合以及细胞分裂等多种重要的生物学功能.CCDC58是一种由人体宿主细胞编码的蛋白质,含有卷曲螺旋结构域,由144个氨基酸组成,编码CCDC58的基因定位于人类3号染色体上.目前对该蛋白的研究不是很多,它的具体作用机制及相关的互作蛋白并不清楚.本实验通过酵母双杂交技术,以CCDC58作为诱饵,在cDNA文库中寻找与CCDC58相互作用的蛋白,最后通过反向验证筛选出5个可能有相互作用的蛋白.为了在体外进一步确认这种相互作用,本实验通过GST Pull-down实验,最终确认TP53BP2和CCDC58具有很强的相互作用.

关键词: 卷曲螺旋结构域, CCDC58, 酵母双杂交技术, GST Pull-down实验