南开大学学报(自然科学版) ›› 2019 ›› Issue (4): 107-.

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敲低EYA3基因抑制人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞的生长

  

  • 出版日期:2019-08-20 发布日期:2019-08-26

  • Online:2019-08-20 Published:2019-08-26

摘要: 为了探讨人眼缺失基因 (EYA3)在人视网膜母细胞瘤发生发展中的生物学作用,构建了EYA3小干扰RNA (siRNA) 的真核表达载体,并验证敲低效果和观察其对人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞生长的影响.根据人EYA3的cDNA序列,将设计含有小发卡结构的寡核苷酸序列克隆到siRNA表达载体上;将重组质粒转染HEK293T细胞中,通过实时定量RT-PCR及Western印迹检测EYA3基因的表达水平;重组质粒稳定转染人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞并利用生长曲线检测EYA3对其生长的影响.结果表明:构建的siRNA能够抑制EYA3基因的表达,生长曲线验证EYA3 siRNA基因能抑制人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞的生长.最后结论是EYA3 siRNA能够抑制人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞的生长,本实验为进一步研究EYA3在视网膜母细胞瘤中的功能奠定了基础.

关键词: EYA3 siRNA, 细胞生长, 稳定表达, 筛选