摘要:
采用浓度2.5-100.0μmol/L的积雪草苷(ATS)处理人结肠癌细胞(HCT-116),CCK-8法检测细胞活性,筛选最佳药物浓度;将HCT-116细胞分为对照组(Control组)、积雪草苷低、中、高浓度组(ATS-L组、ATS-M组、ATS-H组)、积雪草苷高浓度+Wnt激活剂组(ATS-H+LiCl组);Edu检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;划痕实验检测细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭;Westernblot检测细胞核增殖抗原标记物(Ki67)、细胞周期调控因子(P21)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、c-Myc癌基因(c-Myc)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、Wnt3a、β-catenin蛋白表达;裸鼠移植瘤实验检验ATS对结肠癌移植瘤生长的影响。探究积雪草苷(ATS)通过调节Wnt/β-catenin信号通路对结肠癌细胞恶性生物学行为的影响。通过筛选选择ATS浓度为25、50、100μmol/L进行后续实验。结果显示与Control组比较,ATS-L、ATSM、ATS-H组Edu阳性率、细胞划痕愈合率、细胞侵袭数量及Ki67、CyclinD1、c-Myc、MMP-2、MMP-9、Wnt3a、β-catenin表达水平依次降低,细胞凋亡率及P21、Caspase-3、Bax表达水平显著依次升高(P<0.05);与ATS-H组相比,ATS-H+LiCl组Edu阳性率、划痕愈合率、细胞侵袭数量及Ki67、CyclinD1、c-Myc、MMP-2、MMP-9、Wnt3a、β-catenin表达水平升高,细胞凋亡率及Caspase-3、P21、Bax表达水平显著降低(P<0.05)。裸鼠移植瘤实验结果显示,ATS可显著抑制结肠癌移植瘤的生长(P<0.05)。表明ATS可以通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌细胞增殖、迁移与侵袭等恶性生物学行为。