摘要:
为了解环状RNA细胞周期蛋白D1(circ-CCND1)靶向微小RNA(miR)-224-3p/沉默信息调节因子1(SIRT1)轴对食管癌细胞生物学行为的影响。利用qRT-PCR检测食管癌组织和细胞中circ-CCND1、miR-224-3p、SIRT1mRNA表达水平;生物信息学、双荧光素酶实验、pulldown实验、RIP实验验证circ-CCND1、SIRT1与miR-224-3p靶向关系;EdU、CCK-8法测定细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭,Westernblot检测SIRT1、Bcl-2、Bax、MMP9蛋白表达。结果表明,circ-CCND1、SIRT1在食管癌组织和细胞表达升高,miR-224-3p表达降低(P<0.05),选择ECa-109细胞进行后续实验;生物信息学、双荧光素酶实验、pulldown实验、RIP实验证实circ-CCND1、SIRT1与miR-224-3p存在靶向关系;沉默circ-CCND1或过表达miR-224-3p可显著抑制ECa-109细胞增殖、迁移、侵袭,促进凋亡(P<0.05);抑制miR-224-3p表达或过表达SIRT1可逆转沉默circ-CCND1或过表达miR-224-3p对ECa-109细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用,减少凋亡。裸鼠实验显示,沉默circ-CCND1可抑制移植瘤体积和质量,升高miR-224-3p表达水平,降低SIRT1和Ki-67阳性率。结论是circ-CCND1在食管癌中表达上调,沉默circ-CCND1表达可通过调节miR-224-3p/SIRT1轴,抑制细胞增殖、迁移和侵袭,促进凋亡。