摘要：
以乳酸克鲁维酵母（Kluyveromyces lactis）为研究对象，开发了一套扩试制备高纯度GOS的工艺包，包括透性细胞p-cells催化反应、全细胞np-cells发酵纯化。在实验室反应阶段（25 mL），以单位酶活来定义加酶量，消除了以湿细胞浓度为准引起不同实验批次的结果偏差。PBS浓度从50降至5 mmol/L后，对GOS催化制备无影响，但大幅度降低了GOS产品盐含量.在扩试反应阶段（1 L），通过改进加料方式，将最佳反应时间缩短了4倍，消除了放大效应对反应速率的影响.对搅拌转速优化后可得最优条件（加酶量100 U/mL、PBS浓度5 mmol/L、转速400 r/min）下，GOS收率达到19.15%.在扩试纯化阶段（1 L），经优化可得最佳条件（总糖质量浓度100 g/L、全细胞添加量 50 g/L）下纯化所得GOS粗液，经喷雾干燥，GOS纯度达到96.21%，未检测到杂糖，盐含量仅为3.79%，达到低聚糖国标要求。