摘要：

为了研究槐耳清膏治疗肺癌的潜在作用机制，通过知网和TCMSP数据库对槐耳活性成分进行筛选，应用 TCMSP、SwissTargetPrediction 和 SuperPred 数据库在线预测槐耳成分潜在靶点，应用 GeneCards、DrugBank、DisGeNET和PharmGkb数据库收集肺癌靶点，利用它们的交叠搭建“药物-疾病-成分-靶点”以及蛋白质-蛋白质相互作用（protein-protein interaction，PPI）网络，随后开展基因本体（gene ontology, GO）功能富集分析以及京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG）通路的富集分析，通过Kaplan-Meier Plotter数据库验证核心靶点表达与患者生存率的关系。对预测的槐耳活性成分与核心靶点ESR1、EHZ2、HDAC3进行分子对接验证。随后通过体外实验验证槐耳抗肿瘤活性，应用CCK-8实验检测槐耳对人肺腺癌A549细胞的增殖抑制作用，采用Western blot检测槐耳对人肺腺癌A549细胞核心靶点蛋白表达的影响。结果表明，槐耳具有4个活性成分，分别为麦角甾醇、腺苷、胡萝卜苷和EDBO。得到槐耳治疗肺癌的81个靶点。GO分析结果显示，槐耳治疗LC的作用靶点BP集中在细胞内受体信号通路、类固醇代谢过程、体液水平的调节等；MF主要集中在类固醇结合及核受体活性；CC主要集中在溶酶体腔、细胞器外膜等。KEGG富集分析发现主要作用于 PI3K-Akt、雌激素、细胞凋亡等信号通路 。 分析核心靶点表达与患者生存率的关系，结果表明，核心靶点ESR1、EZH2和HDAC3与肺癌患者的生存率相关。分子对接结果显示，核心靶点与槐耳有效成分能够很好地结合。体外实验结果显示，不同浓度槐耳清膏抑制人肺腺癌细胞A549的增殖并且呈现剂量依赖。经槐耳清膏处理后，人肺腺癌细胞中ESR1、EZH2和HDAC3的表达水平出现下降，表明槐耳清膏在人肺腺癌细胞中可以通过多个靶点抑制细胞的增殖，促进细胞凋亡，从而发挥抗癌作用。